Kategorie

Populární Příspěvky

1 Tachykardie
Když krevní test na hCG může určit těhotenství?
2 Tachykardie
Po implantaci krvácení, když se objeví test
3 Tachykardie
C reaktivní protein se zvýšil u těhotných žen
4 Tachykardie
Efektivní tlakové tablety
5 Embolie
Proč se hemoroidy objevují během těhotenství v různých časech: důvody, léčba, prevence, výživa a tipy, jak snížit nepohodlí
Image
Hlavní // Embolie

Stanovení osmotické rezistence červených krvinek


Pro posouzení fyzikálně-chemických vlastností červených krvinek se zkoumá jejich odolnost vůči různým vlivům. V praxi se nejčastěji určuje osmotická rezistence červených krvinek. Rozlišujte mezi minimálním a maximálním odporem. Minimální rezistence červených krvinek je určena maximální koncentrací hypotonického (méně než 0,85%) roztoku chloridu sodného (v sérii postupně klesajících koncentrací), při které začíná hemolýza nejméně stabilních červených krvinek v roztoku po dobu 3 hodin. Maximální rezistence červených krvinek je stanovena maximální koncentrací hypotonického roztoku chloridu sodného, způsobující hemolýzu všech červených krvinek během 3 hodin.

Sjednocená metoda pro stanovení osmotické rezistence červených krvinek při modifikaci L. I. Idelson

Zásada. Kvantitativní stanovení stupně hemolýzy červených krvinek v pufrovaných hypotonických roztocích chloridu sodného.

Činidla: zásobní roztok (osmotická koncentrace odpovídá 10% roztoku chloridu sodného), pH 7,4: bezvodý hydrogenfosforečnan sodný (Na2HPO4) - 27,31 g nebo krystalický hydrát (Na2HPO4 × 2H20) - 34,23 g; krystalický hydrát dihydrogenfosforečnanu sodného (NaH2PO4 × 2H2O) - 4,86 ​​g: chlorid sodný - 180 g; destilovaná voda - do 2 litrů. Roztok může být skladován v uzavřené nádobě v lednici několik měsíců.

Bázický roztok se zředí 10krát destilovanou vodou, čímž se získá roztok odpovídající 1% roztoku chloridu sodného osmotickou koncentrací. Z tohoto roztoku se připraví pracovní roztoky odpovídající roztokům chloridu sodného následujících koncentrací: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10 %%. Doporučuje se připravit 100 ml těchto pracovních roztoků. Skladujte v chladničce, jsou vhodné po dobu 2 týdnů.

Speciální vybavení: 1) fotoelektrokolorimetr; 2) termostat při 37 ° C.

Průběh odhodlání. 1,5 ml krve se přidá do dvou sterilních zkumavek se 2 kapkami heparinu (500 PIECES), smíchá se a jedna se použije pro výzkum a druhá se ponechá v termostatu na jeden den. 5 ml každého z pracovních roztoků s koncentrací chloridu sodného od 1 do 0,10% se nalije do řady centrifugačních zkumavek (14 ks). Do každé zkumavky se přidá 0,02 ml heparinizované krve a nechá se 30 minut při teplotě místnosti. Směs se odstřeďuje při 2000 ot / min po dobu 5 minut. Supernatant se vypustí z každé zkumavky a fotometricky při vlnové délce 500–560 nm (zelený filtr) v kyvetě s délkou optické dráhy 1 cm proti kontrolnímu vzorku..

Kontrolní vzorek - supernatant ve zkumavce obsahující pracovní roztok s koncentrací chloridu sodného 1%.

Způsob platby. Pro úplnou (100%) hemolýzu se hemolýza provádí in vitro s 0,1% roztokem chloridu sodného. Procento hemolýzy v každé zkumavce se vypočte porovnáním extinkční hodnoty supernatantu s extinkcí, považované za 100%, podle vzorce:

kde e1 - extinkce supernatantu ve zkumavce 0,1% roztokem chloridu sodného; EX - zánik zkušebního vzorku; 100 - úplná hemolýza in vitro 0,1% roztokem chloridu sodného.

Následující den zopakujte studii s krví inkubovanou po dobu 24 hodin při 37 ° C..

Normální hodnoty. U zdravých lidí začíná u čerstvé krve hemolýza (minimální rezistence vůči erytrocytům) při koncentraci chloridu sodného 0,50-0,45% a úplná hemolýza (maximální rezistence k erytrocytům) je pozorována v 0,40 až 0,35% roztoku chloridu sodného.

Klinický význam. Tato studie se provádí pro podezření na hemolytickou anémii. Sferocyty jsou nejméně rezistentní na hypotonické roztoky (výskyt hemolýzy erytrocytů byl zaznamenán při vyšších koncentracích chloridu sodného 0,75–0,70%). Snížení osmotické rezistence je pozorováno nejen u dědičné mikrosférocytózy, ale také u některé dědičné nesferérické hemolytické anémie s autoimunitní hemolytickou anémií. Zvýšení osmotické rezistence červených krvinek je charakteristické pro thalassemii, hemoglobinopatii, pravděpodobně s obstrukční žloutenkou.

Jak je definice a výsledky studie osmotické rezistence červených krvinek, norem a odchylek

Pro posouzení fyzikálních a chemických vlastností červených krvinek je organizována diagnóza rezistence na různé vlivy. Nejčastěji je vyžadován osmotický typ odporu. Je minimální a maximální. Minimum se vypočítá na základě maximální koncentrace roztoku chloridu sodného, ​​kdy začíná hemolýza nejslabších červených krvinek. Maximální odpor je určen maximální koncentrací roztoku, ve kterém je smrt všech krevních buněk.

Popis

Osmotický odpor - odolnost vůči osmotickému tlaku. Nainstaluje se pomocí speciálních diagnostických metod. Nadbytek, pokles označuje progresi onemocnění, a proto je nutné neustále sledovat tento indikátor.

Odpor je minimální a maximální:

  • maximum - účinek na červené krvinky za 3 hodiny & # 8211, podstoupí smrt buněk,
  • minimum - koncentrace, pod jejímž vlivem začíná destrukce nejslabších buněk v následujících 3 hodinách.

Zajímavý fakt! Stanovení ukazatelů osmotické rezistence v erytrocytech odpovídá jejich věku, především & # 8211, u mladých.

Proces hemolýzy v těle

V těle neustále probíhá hemolýza. Staré červené krvinky umírají, místo nich se v hematopoetickém systému vytvářejí nové - mladé, účinné.

Fyziologická hemolýza ve zdravém těle - přirozená smrt starých červených krvinek ve slezině, játrech, červené kostní dřeni.

Zcela odlišným procesem je patologická hemolýza, kdy začínají umírat mladé zdravé buňky. Pouze nepříznivé faktory mohou ovlivnit zdravé buňky, vyvolat jejich transformaci do sférických forem, poškození membrány.

Buněčná membrána není náchylná k natahování od přírody, proto se zlomí a hemoglobin uvnitř volně proniká plazmou. Plazma pro ni získává nepřirozený stín. Hlavním vizuálním znakem patologické hemolýzy je lesklé červené sérum..

Metody inspekce

Častěji je zkouška organizována pomocí unikátní techniky pro stanovení stability L.I. Idelson. Činidlo se stává 10% roztokem. Skladujte je v chladničce několik měsíců v nádobě s víkem.

Roztok se zředí desetkrát destilovanou vodou a z něj se vyrobí mnoho pracovníků s různými koncentracemi - každý 100 ml, v případě potřeby i vyčištěný v lednici, lze použít v následujících 2 týdnech.

Zařízení bude také vyžadovat 37 stupňový termostat a fotoelektrický kolorimetr.

U člověka s normálním zdravím začíná hemolýza krve 0,5-0,45%, kompletní rozpad je pozorován u 0,4-0,35%.

Tato výzkumná metoda je implementována v případě vysoké pravděpodobnosti detekce hemolytické anémie. Poté dochází k hemolýze v koncentraci 0,75-0,7%.

Snížená rezistence je zaznamenána u dědičné anémie, autoimunitní anémie. Ke zvýšení dochází na pozadí thalassémie, obstrukční žloutenky.

Existují i ​​další modifikace studia normální rezistence buněk, konkrétně:

  1. Vizuální metoda vědců Ribiera a Limbeka. Pro stanovení diagnózy je třeba přidat 20 ml kapilární krve do zkumavek, kde je již k dispozici 10 ml roztoku NaCl. Směs se nechá hodinu při teplotě 15 až 25 stupňů. Potom se roztok odstřeďuje po dobu 3 minut rychlostí 2000 ot./min. Teprve poté začne laboratorní asistent stanovit minimální a maximální odpor. Tato metoda vyžaduje značné množství krve, jejím hlavním nedostatkem je malá přesnost a nesoulad s obecně uznávanými standardy.
  2. Kolorimetrická metoda. Zahrnuje přímou detekci koncentrace hemoglobinu produkovaného červenými krvinkami během hemolýzy. Nejprve se do zkumavek vloží roztok NaCl, poté se z něj vytvoří červené krvinky. Potom se pomocí Saliho hemometru vypočítá obsah hemoglobinu a nakreslí se hemolytická křivka. Tento způsob si zachovává nevýhody předchozího.
  3. Smíchání červených krvinek a roztoku ve spektrofotomeru, stanovení optické hustoty. Vlnová délka je přibližně 650 nm, teplota v místnosti je 20 stupňů. Hlavní nevýhodou je nutnost použití speciálního vybavení.
  4. Registrace optické hustoty solného roztoku, když jím prochází světelná vlna o délce 650 - 750 nm. Diagnóza trvá jen několik minut..

Existuje také pokročilejší způsob L.I. Idelson. K tomu jsou zapotřebí 3 zkumavky - v nich 0,01 ml krve. Ten se odstřeďuje po dobu 10 minut a potom se pomocí spektrografu a vlnové délky 414 nm vyhodnotí absorpce kapaliny kapalinou přes sraženinu. Tato metoda pomáhá snížit složitost analýzy, snižuje náklady na laboratorní kapacitu. Má však také mínus - intenzita absorpce se mění pod vlivem různých forem hemoglobinu.

Provádění

Detekce WEM se provádí přidáním stejného objemu krve, obvykle 0,22 ml, do roztoku různých koncentrací - od 0,7 do 0,22%. Po 60 minutách se směs odstředí. Barvou kapaliny se zaznamenává nástup hemolýzy a poté její kompletní průchod.

Na začátku je kapalina světle růžová. Nasycený odstín označuje dokončení rozkladu červených krvinek. Výsledky jsou stanoveny na dvě číslice - minimální a maximální odpor.

Norma

Snížení v normě je zaznamenáno u lidí v pokročilém věku. U dětí mladších 2 let je často zaznamenán mírný nárůst..

Norma WEM je následující:

  • maximálně 0,32-0,34%,
  • minimálně 0,46 až 0,48%.

Odchylky

Existuje mnoho důvodů pro odchylky. Maximální rezistence se nejčastěji projevuje v takových patologiích:

  • thalassemia,
  • polycytémie,
  • splenektomie,
  • hemoglobinopatie,
  • silné krvácení,
  • žloutenka,
  • onkologie v zažívacím traktu,
  • ateroskleróza.

S takovými patologiemi je spojena minimální rezistence:

  • anémie u kojenců,
  • otrava parou,
  • genetická anémie.

Mírný pokles indikuje tyto patologické stavy:

  • leukémie,
  • tuberkulóza,
  • cirhóza,
  • polycythemia některých typů,
  • přítomnost sférických červených krvinek v krvi,
  • srdeční selhání, vyvolávající otok červených krvinek do kulovitého tvaru - tím se snižuje jejich životnost,
  • stárnutí erytrocytů, dokončení jejich životního cyklu, na jehož pozadí se zvyšuje propustnost stěn.

Příznaky

Klinické příznaky jsou obecné. Specifické projevy poukazující pouze na odchylku WEM od normy se nevyvíjejí.

Příznaky problému jsou obvykle následující:

  • blanšírování kůže,
  • hubnout,
  • rychlá únava, neustále postupující slabost - připomíná vyvíjející se chronický únavový syndrom,
  • ztráta chuti k jídlu,
  • neustálá touha spát,
  • exacerbace patologií chronických forem.

S rozvojem uvedených příznaků musíte navštívit lékaře, který diagnostikuje příčiny. Nejprve musíte navštívit terapeuta, pak odešle pacienta k hematologovi a dalším odborníkům.

Je důležité to vědět! Pokud diagnóza potvrdí bolestivou změnu, je nutná léčba. Většina příčin selhání formule ohrožuje nejen zdraví, ale i lidský život.

Jak normalizovat podmínku

Při odhalování selhání WEM se vyžaduje vyšetření, aby se zjistily přesné příčiny porušení. Pokud patologie není dědičná, vlastnosti červených krvinek se po zastavení jejích příčin rychle normalizují. Například při anémii je vyžadována léčba kortikosteroidy, přičemž je indikována hemolýza kyselina listová, železo a vitamínové komplexy.

Při častých opakovaných selháních analýz může být předepsána realizace spasektomie..

Preventivní metody

Genetickým problémům s rezistencí nelze zabránit, specializovaný genetik může navštívit pacienta s takovými poruchami, aby identifikoval poškozený gen, který může přenést nemoc na další generaci. Prevence dědičných chorob je použití terapeutických opatření během krize. V jiných situacích poskytuje příznivé podmínky pro procesy tvorby krve prostřednictvím racionální výživy, příjmu komplexů vitamínů a udržováním zdravého životního stylu..

Závislost odolnosti na zralosti, tvaru buňky

WEM odpovídá tvaru buněk. Odolnost je menší s jasným kulovým tvarem. Tyto buňky jsou náchylnější k poškození..

Tvar červených krvinek je způsoben genetikou, ale s věkem se také mění.

Rezistence buněk je ovlivněna věkem. V mladých plochých buňkách je vyšší.

Hranice udržitelnosti

Podle výsledků studie je obvykle detekována horní a dolní hranice rezistence krevních buněk.

Dolní odpovídá koncentraci, při které se začnou rozkládat první slabé červené krvinky.

Horní koncentrace, když úplná hemolýza prochází za 3 hodiny.

Snížení ukazatelů na 0,32% nebo méně je tedy diagnostikováno s velkou ztrátou krve, s kongestivní žloutenkou v důsledku operace resekce sleziny..

Významný přebytek - z 0,48% - se vyvíjí s hemolytickou anémií u kojenců po otravě olovem.

Hraniční expanze je fixována v akutním průběhu zhoubné anémie, hemolytické krize.

ORE je charakterizována diagnózou rezistence membrány erytrocytů na patologické faktory pro ně. Zdravé buňky vysoké kvality se vyznačují dobrou odolností membrány po vzniku hematopoetického systému. Minimální odpor nastává pouze se stárnutím na konci životního cyklu. Pak jsou takové buňky označeny imunitou, tělo je využívá ve slezině.

Hlavním způsobem detekce ORE je interakce hypotonického roztoku různých koncentrací a krve. Analýza pomáhá zkoumat stabilitu membrány erytrocytů a zaznamenat hranice rezistence.

Takže mladé ploché buňky jsou odolnější, objevují se v krvi okamžitě z kostní dřeně. Jejich sféričnost bývá nulová.

Stanovení osmotické rezistence červených krvinek

Červené krvinky - červené krvinky obsahující respirační pigment - hemoglobin. Tyto buňky bez jader jsou tvořeny v červené kostní dřeni a jsou zničeny ve slezině.

1). Červené krvinky u mužů od 4,5 do 5,5 * 1012 g / l (u mužů více díky produkci hormonu testosteronu).

Červené krvinky u žen od 3,7 do 4,7 * 1012 g / l

Nejdůležitější funkce červených krvinek jsou:

Počet erytrocytů pomocí Burgerovy kamery s Goryaevovou mřížkou. Pro počítání červených krvinek je nutná Burgerova komora s Goryaevovou mřížkou, zkušební krev, 3,5% roztok chloridu sodného, ​​mikroskop s čočkou 40 a okulár 7, sterilní zkumavky.

Hemolýza - (hemo-krev, lýza - destrukce) je destrukce membrány červených krvinek. Druhy hemolýzy:

2. Biologické (transfúze nekompatibilní krve).

5. Osmotický - v hypotonických roztocích s krevně substitučními roztoky.

Osmotická odolnost červených krvinek je odolnost červených krvinek vůči nízkým koncentracím.

30. Hemoglobin (struktura, vlastnosti, množství). Jeho spojení. Metody pro stanovení množství hemoglobinu.

Hemoglobin je respirační pigment, který se nachází v červených krvinkách a sestává z bílkoviny globinu a čtyř molekul železa. Hemoglobin je hlavní složkou červených krvinek, díky níž je transportován kyslík. Arteriální krevní světlo je jasně červené. Hemoglobin se účastní imunologických reakcí. Hb u žen - 120 - 140 g / l. Hb u mužů - 130 - 160 g / l.

Vlastnosti hemoglobinu: Hemoglobin je nezbytný pro naše tělo, aby došlo k výměně plynu mezi tělem a prostředím. Díky hemoglobinu je kyslík přenášen krví z plic do tkání a oxid uhličitý je také přenášen z tkání do plic. Hemoglobin také udržuje rovnováhu acidobazické rovnováhy v těle každého člověka..

Typy připojení:

1). Fyziologický:

B) HbCO2- karbhemoglobin

2). Patologické:

A). HbCO - karboxyhemoglobin (sloučenina oxidu uhelnatého).

B) Methemoglobin se tvoří pod vlivem silných oxidačních činidel (kyanidy, jedy rostlin, KMnO4)

NA). Myogemoglobin - svalový hemoglobin.

Množství hemoglobinu může být stanoveno buď spektroskopicky, stanovením množství železa nebo měřením barvicí schopnosti krve (kolorimetricky). Pro klinické účely se používá druhá metoda, která vyžaduje malé množství krve a umožňuje rychle stanovit množství hemoglobinu. Nejběžnější je metoda Sali. (Na otázku, co to je Saliho definice hemoglobinu je založena na skutečnosti, že krevní hemoglobin v roztoku kyseliny chlorovodíkové přechází na hematin hydrochlorid, což je ve srovnání se specifickou koncentrací hematinu, považováno za standard. Procento hemoglobinu je v tomto případě stanoveno kolorimetricky).

31. CPU, jeho význam. ESR a faktory, které jej ovlivňují.

Barevným indikátorem je stupeň nasycení červených krvinek hemoglobinem.

CP = Hb * 3 / první dvě počty červených krvinek * 10 = normální 0,9 - 1. Stanovení počtu krevních krvinek je důležité pro diferenciální diagnostiku anémie různých etiologií.

Míra sedimentace erytrocytů, obvykle u mužů 2-10 mm / h, u žen 3-15 mm / h (ženy mají větší obsah globulinu). Hodnota ESR závisí na vlastnostech krevní plazmy a počtu červených krvinek.

ESR se zvyšuje s:

Zánětlivá, infekční a onkologická onemocnění

Příznaky osmotické rezistence červených krvinek a metoda pro stanovení indikátorů

Červené krvinky (jiné jméno jsou červené krvinky) jsou krvinky, jejichž hlavní funkcí je transport kyslíku s krví z plic do všech orgánů a tkání a pohyb oxidu uhličitého v opačném směru. Jakékoli narušení normálního fungování těla může vést ke změně složení krve a následně k negativnímu účinku na tyto buňky.

Termín „odpor“ (z latinské rezistence - rezistence, rezistence) znamená rezistenci na jakýkoli faktor. Tento článek pojednává o osmotické rezistenci červených krvinek..

Osmotický tlak (z řeckého osmos - tlak, tlak) nastává v důsledku pronikání semipermeabilní membránou vody z roztoku s nižší koncentrací do roztoku s vyšší koncentrací k dosažení rovnováhy.

Pokud jde o červené krvinky, uvažuje se systém „krevní plazma - membrána - cytoplazma (vnitřní obsah buňky)“. Ale v lidském těle je membrána každé buňky selektivně propustná, to znamená, že koncentrace většiny látek v cytoplazmě buňky a jejího prostředí jsou různé.

Schopnost červených krvinek inhibovat osmotický tlak se nazývá osmotická rezistence..

Metoda indikátoru

V laboratoři je studium osmotické rezistence červených krvinek prováděno ředěním krve v roztokech chloridu sodného (NaCl) různých koncentrací. Ve srovnání s obsahem sodných a chlorových iontů v cytoplazmě erytrocytů se roztoky rozlišují:

  • Izotonický. Koncentrace soli je přibližně 0,9% - to je její norma v krvi. V tom nedochází ke změnám v krevních buňkách. Jeho jiné jméno je všeobecně známé - slaný roztok (slaný).
  • Hypotonický. Koncentrace iontů v nich je v důsledku osmotického tlaku nižší, voda vstupuje do červených krvinek a nabobtnávají hemolýzu (destrukci).
  • Hypertonický. Obsah solí v nich je větší - buňky uvolňují vodu a smršťují se.

Metodika hodnocení osmotické rezistence červených krvinek je následující:

  • hypotonické roztoky (protože v nich je pozorována hemolýza) běžné soli různých koncentrací (obvykle v rozmezí 0,22 až 0,7%) se nalijí do zkumavek,
  • přidat 0,02 ml krve odebrané z prstu nebo ze žíly (odtud budou výsledky „čistší“),
  • výsledné roztoky se udržují na expozici asi hodinu (pro vliv osmotického tlaku na červené krvinky),
  • po odstředění obsahu zkumavky.

Stupeň hemolýzy je určen odstínem (úplná hemolýza je jasně červený roztok, jeho začátek je roztok s narůžovělým nádechem), pro získání přesnějších ukazatelů je použit fotokolorimetr - přístroj pro optické měření koncentrace látky.

V laboratorní diagnostice se pro stanovení osmotické rezistence červených krvinek používají následující indikátory:

  • Maximální odpor. Rovná se koncentraci roztoku NaCl, při které dojde k úplné hemolýze do tří hodin. Norma pro dospělého je od 0,32 do 0,34%, norma pro kojence je 0,24 až 0,32% a pro předškolní věk je 0,26 až 0,36%..
  • Minimální odpor. Rovná se koncentraci stejného roztoku, při níž se nestabilní buňky podrobí hemolýze během tří hodin (barva roztoku se ukáže být mírně růžová). Norma pro dospělého je 0,46 až 0,48%, norma pro kojence je 0,46–0,50% a pro předškolní věk je 0,46–0,48%..

Obecně je u lidí značného věku osmotická odolnost červených krvinek nižší, u dětí je vyšší, ale její rozsah je širší.

Důvody pro změnu ukazatelů

Ke zvýšení osmotické rezistence (maximální rezistence menší než 0,32%) dochází při následujících patologiích:

  1. Masivní ztráta krve (více než 5% objemu krve), protože se počet mladých červených krvinek zvyšuje jako kompenzační mechanismus v krvi, ale v podmínkách nedostatku zdrojů. Výsledkem je vytvoření velkého počtu buněk s nedostatečně silnými membránami..
  2. Ateroskleróza: deriváty cholesterolu se mohou ukládat na membránu erytrocytů, což vede ke změně jeho vlastností.
  3. Obstrukční žloutenka, její příčiny: zablokování žlučovodu v důsledku tvorby žlučových kamenů, onemocnění žlučníku a některých onemocnění jater.
  4. Dědičná anémie spojená se změnou struktury hemoglobinu (hemoglobinopatie): thalassémie, srpkovitá anémie.
  5. Dědičná onemocnění, jejichž výsledkem je struktura membrány erytrocytů (membránová patologie).
  6. Stav po odstranění sleziny.
  7. Pravá polycytémie - nadměrný nárůst počtu krvinek v důsledku nádoru v krevotvorných orgánech.
  8. Gastrointestinální rakovina.

Snížení osmotického odporu (minimum se zvýší nad 0,48%) může být spojeno s:

  1. Otrava olovem a jeho deriváty.
  2. Hemolytická anémie, při které dochází k masivní hemolýze červených krvinek. Důvody jsou různé: autoimunita, dědičná onemocnění, hemolytická žloutenka novorozenců a další.
  3. Mírný pokles je možný v důsledku tuberkulózy, srdečního selhání, leukémie (rakovina krve), cirhózy.

Příznaky patologické rezistence červených krvinek a metody boje

Normálně je jedním ze známek „starých“ červených krvinek (čas strávený v krevní plazmě: 100–120 dnů) nízká osmotická rezistence. Dalším je tvar buňky: zralé červené krvinky jsou bikonkávní, mladé buňky jsou mírně ploché a ty, které ukončují buněčný cyklus, jsou sférické. Imunitní buňky tyto buňky rozpoznávají a ničí ve slezině.

Patologická osmotická rezistence červených krvinek může vést k nekontrolované hemolýze přímo v krevním řečišti, což vede k následujícím příznakům:

  • bledá sliznice, někdy - kůže,
  • rychlá únava,
  • ztráta chuti k jídlu,
  • ztráta váhy,
  • neustálé zvyšování teploty,
  • ospalost.

Vzhledem k nízké specifičnosti příznaků je tato patologie častěji detekována až po laboratorních testech. Nejúčinnějším způsobem léčby je odstranění příčiny, tj. Základního onemocnění (pokud je to dědičné, provádí se symptomatická terapie). Preventivní opatření jsou všeobecná: zdravý životní styl, správná výživa, včasný přístup k odborníkům.

Osmotická rezistence červených krvinek - koncept, metoda pro stanovení indikátorů

Osmotická rezistence červených krvinek

Červené krvinky (nebo červené krvinky) jsou nejpočetnější krvinky. Speciální membránové zařízení jim umožňuje zachytit molekuly kyslíku v kapilárách plic a transportovat je do tkání a orgánů. Avšak s určitými patologiemi se struktura membrány erytrocytů stává méně stabilní a snadno se ničí. Tyto změny vedou k významnému snížení počtu červených těl v krvi a následnému narušení metabolismu kyslíku v tkáních těla.

Schopnost membrán červených krvinek odolávat destrukci vlivem nepříznivých faktorů se nazývá rezistence. Při diagnostice onemocnění má zvláštní význam osmotická rezistence (REM) - udržování stability buněčné membrány při měnící se koncentraci rozpuštěných solí v jejím prostředí.

Metoda měření osmotického odporu

Krevní buňky jsou schopny normálně fungovat v izotonickém roztoku (obsah iontů NaCl nepřesahuje 0,85%). Tato koncentrace NaCl odpovídá počtu solných iontů v krevním séru. Tyto roztoky, které obsahují více solí, se nazývají hypertonické a méně hypotonické. Membrány buněk umístěné v takových roztocích se rychle ničí..

Červené krvinky zdravého člověka jsou schopny odolat změnám osmotického tlaku, tj. Mají silnou membránu. Ke stanovení rezistence membrán krevních buněk se používá následující metodika:

  1. Roztok NaCl s různým stupněm koncentrace se umístí do zkumavek (od největšího - 0,7% po nejnižší - 0,22%);
  2. Do každé zkumavky se přidá malé množství krve (ne více než 0,02 ml);
  3. Další hodinu se zkumavky udržují při teplotě 22 až 23 ° C;
  4. Výsledné roztoky se odstředí a zbývající doba začátku destrukce krevních buněk a okamžik jejich úplné hemolýzy se vypočte podle barvy obsahu;

Mírně růžový roztok naznačuje, že červené krvinky se začaly rozpadat, zatímco jasně červená barva je známkou toho, že se buňky úplně rozloží..

Pomocí této analýzy se stanoví minimální a maximální osmotická rezistence krvinek. Maximum odpovídá hodnotě obsahu NaCl, při které dochází k úplné destrukci krvinek. Minimum je určeno množstvím, při kterém jsou buňky nejméně zničeny.

Příprava na postup. Normální hodnoty odporu.

Výpočet hodnot osmotického odporu určí příčinu nedostatku červených krvinek v krvi pacienta. Pro analýzu se krev odebere ze žíly a okamžitě se umístí do zkumavky s antikoagulačním činidlem, aby se zabránilo koagulaci. Před provedením analýzy není třeba žádných zvláštních přípravků - pacient nemusí měnit svou obvyklou stravu.

Pro dospělé jsou následující hodnoty normální ukazatele:

  • minimální odpor - ne vyšší než 0,48%;
  • maximum - ne nižší než 0,32%

Je třeba si uvědomit, že u malých dětí jsou ukazatele rezistence výrazně vyšší než u dospělých pacientů, zatímco u starších dětí je mírně nižší než obvykle..

Spolehlivost analytických dat může ovlivnit několik faktorů:

  • nedávná krevní transfúze;
  • přítomnost patogenních mikroorganismů ve vzorku, které způsobují hemolýzu buněk;
  • některá onemocnění, u nichž je počet zralých červených krvinek v krvi minimální (závažné formy anémie);
  • konečně, lidský faktor - neopatrné zacházení s naplněnými zkumavkami může vést k předčasné hemolýze;

Pokud výše uvedené důvody chyběly a výsledek analýzy je mimo normální rozsah, můžeme hovořit o závažném onemocnění, po kterém následují významné metabolické poruchy v těle.

Odchylky od standardních ukazatelů

WEM méně než 0,33% se vyvíjí v následujících situacích:

  • významná ztráta krve;
  • s thalassemií (dědičné onemocnění, při kterém je narušena syntéza proteinů, které tvoří hemoglobin);
  • se splenektomií (odstranění části sleziny - orgán, který se aktivně podílí na procesech tvorby krve);
  • s polycytémií (narušené hematopoetické buňky kostní dřeně);

Odolnost více než 0,48% je spojena s chorobami, jako jsou:

  • hereditární hemolytická anémie (zděděná patologie, při které tělo aktivně ničí své vlastní krvinky);
  • hemolytická anémie novorozenců (diagnostikovaná během prvních dnů života dítěte. Může být dědičná nebo získaná);
  • otrava solí těžkých kovů;

Odchylky od normálních indikátorů rezistence zpravidla indikují poruchy v těle a nejčastěji jsou diagnostikované patologie dědičné.

Prevence poklesu WEM

Dědičné choroby se zpravidla stávají příčinou snížení buněčné rezistence. Pacienti, kteří se setkají s takovým problémem, se mohou obrátit na genetika, aby vypočítali možnost výskytu stejného onemocnění u svých dětí. V jiných případech je prevence poklesu hustoty membrány krevních buněk snížena na udržení zdravého životního stylu, nepřítomnost špatných návyků a vytvoření nejvýhodnějších podmínek pro proces krvetvorby..

Příznaky snížené rezistence na krvinky

Dokonce před analýzou může pacient najít známky snížení stability membrán krvinek. Zde jsou hlavní projevy této odchylky:

  • Ospalost;
  • Depresivní stav;
  • Výrazné hubnutí;
  • Anémie sliznic;
  • Horečka;
  • Nedostatek zájmu o jídlo;

Uvedené příznaky by měly být závažným důvodem k obavám. Pokud jsou nalezeny, měli byste se okamžitě domluvit s lékařem a podrobit se plnému vyšetření. Čím dříve je stanovena diagnóza, tím může být zahájena rychlejší léčba a tím menší poškození těla.

Závislost stability membrány na tvaru krvinek a na jejich věkových změnách

Hustota membrány závisí nejen na věku buněk, ale také na jejich tvaru. Vytvořené červené krvinky mají tvar bikonkávního disku, lze však také nalézt degenerativní formy červených krvinek: kulové, hvězdicovité, lunátové, srpkovité atd. Různá onemocnění se vyznačují změnami v krevních buňkách. Například s srpkovitou anémií se vytvoří srpkovité červené krvinky, thalassemie je charakterizována výskytem oválných buněk, většina typů anémie se projevuje výskytem sférocytů - sférických červených krvinek.

Normální membránová stabilita mají pouze červené krvinky ve formě bikonkávního disku. Červené krvinky různé konfigurace jsou méně životaschopné - jejich rezistence je 0,4-0,6% s normálními hodnotami 0,32-0,48%. Navíc takové buňky zpravidla nejsou schopny účinně vykonávat své funkce. Z patologických forem se nejčastěji vyskytují oválné červené krvinky. Tyto buňky lze pozorovat nejen u krevních onemocnění, ale také u zcela zdravých lidí, protože čím jsou červené krvinky starší, tím více se stávají.

Nejodolnější jsou tedy mladé, nedávno vytvořené červené krvinky, které se vyznačují nejvýraznějším tvarem disku.

Metodika výpočtu osmotické rezistence se často používá k detekci hemoglobinopatie a dalších onemocnění krve a je účinná a jednoduchá. Nejčastěji se používá k detekci hemolytické anémie a onhemematologie (včetně novorozenců)..

Osmotická rezistence červených krvinek

Osmotická rezistence červených krvinek je indikátorem rezistence červených krvinek na osmotický tlak. Odpor CCP je určen pouze diagnostickými opatřeními. Překročení nebo snížení normy bude znamenat vývoj určitého patologického procesu, a proto by měl být indikátor vždy sledován.

Osmotická odolnost červených krvinek má minimální a maximální hodnoty:

  • maximum je účinek hypotonického roztoku chloridu sodného, ​​kdy k hemolýze absolutně všech buněk dojde během tří hodin;
  • minimum - expozice látce jiné koncentrace, při níž jsou zničeny pouze minimálně stabilní buňky.

Je třeba poznamenat, že osmotická odolnost červených krvinek bude záviset na jejich věku. Největší odpor mladých CCP jako v nejvíce plochých.

Definice

Osmotická rezistence červených krvinek se stanoví takto:

  • používá se několik skleněných zkumavek, ve kterých se nalije roztok chloridu sodného různých koncentrací - nejčastěji od 0,7 do 22%;
  • vzorky krve se přidávají do zkumavek s roztokem, ale pouze ve stejném množství;
  • vzorky se umístí při pokojové teplotě po dobu 60 minut;
  • po uplynutí expirace zkumavek se vzorky centrifugují;
  • tekutá barva získaná poté bude indikovat osmotickou odolnost červených krvinek.

Pokud je barva kapaliny růžová, znamená to minimální koncentraci, ale jasně červená barva znamená maximum. Norma pro sférickou odolnost červených krvinek je 0,32 až 0,44 procenta roztoku chloridu sodného.

Norma

Norma pro dospělého je následující:

  • maximální stabilita - norma 0,32–0,34%;
  • minimální osmotická odolnost červených krvinek - 0,46–0,48%.

Pokud není dodržena norma, to znamená, že ukazatele jsou vyšší nebo nižší, může to znamenat vývoj určitého patologického procesu v těle. I malá odchylka od normy může naznačovat poměrně závažné patologické procesy v těle, takže je třeba regulovat osmotický tlak.

Důvody pro odchylku od normy

Norma ukazatelů může být porušena kvůli určitým nemocem jak akutního, tak chronického typu. Maximální indexy odporu lze pozorovat v následujících případech:

  • ateroskleróza;
  • zhoubné novotvary v gastrointestinálním traktu;
  • thalassemia;
  • polycytémie, ale pouze v některých případech;
  • splenektomie;
  • hemoglobinopatie;
  • hemoglobinóza;
  • kongestivní žloutenka;
  • vrozená krevní onemocnění;
  • systémové a autoimunitní patologie.

Minimální osmotická rezistence může být výsledkem těchto patologických procesů:

  • Anémie s nedostatkem železa;
  • hemolytická anémie u novorozenců;
  • otrava těžkými kovy;
  • rozsáhlá intoxikace těla;
  • dědičná forma hemolytické anémie.

Malá odchylka od normy může být způsobena těmito chorobami:

Predispoziční faktory ke snížení stability CCP:

  • produkce sférických červených krvinek - genetická abnormalita;
  • dokončení životního cyklu ČKS, což vede ke kulovému tvaru;
  • kardiovaskulární choroby.

To, co přesně vedlo k takovému porušení, lze určit pouze pomocí diagnostických opatření. Důvodem zahájení zkoušky bude odpovídající klinický obraz..

Symptomatologie

Klinický obraz bude obecný. Nejsou žádné specifické příznaky, které budou charakteristické pouze pro odchylku od normy rezistence na CCP.

Příznaky této povahy mohou být přítomny:

  • bledost kůže;
  • hubnutí bez zjevného důvodu;
  • zvýšená únava a rostoucí slabost, která bude spíše jako chronický únavový syndrom;
  • nechutenství;
  • ospalost;
  • exacerbace chronických onemocnění.

Pokud máte klinický obraz, musíte navštívit lékaře. Zpočátku je to praktický lékař, tj. Terapeut. Další vyšetření provádí hematolog a příbuzní odborníci..

Pokud je diagnosticky stanoveno, že ukazatele jsou nižší nebo vyšší než přijatelné, musí být léčba povinná, protože většina etiologických faktorů představuje nebezpečí nejen pro zdraví, ale také pro život pacienta.

Léčba bude založena výhradně na kořenové příčině patologie. Terapeutická opatření mohou být konzervativní nebo radikální. Prognóza je pouze individuální..

3. Metodika pro stanovení osmotické rezistence červených krvinek a průměru červených krvinek. Stanovení rychlosti sedimentace erytrocytů (ESR). Diagnostická hodnota.

Rezistence - vlastnost červených krvinek odolávat destruktivním vlivům: tepelným, osmotickým, mechanickým atd. Na klinice získala definice osmotického odporu největší význam..

Princip metody spočívá v tom, že se červené krvinky smršťují v hypertonických solných roztocích a bobtnají v hypotonickém solném roztoku. Při výrazném otoku dochází k hemolýze.

Ve zkumavkách se připravují roztoky chloridu sodného o různých koncentracích (od 0,70 do 0,22%), potom se do nich přidá stejný objem krve (0,02 ml) a nechá se hodinu při pokojové teplotě. Po jedné hodině se zkumavky odstředí a počátek hemolýzy se stanoví světle růžovým zabarvením roztoku a úplná hemolýza se stanoví intenzivní barvou červeného laku roztoku.

Obvykle se minimální rezistence u dospělých pohybuje mezi 0,48% a 0,46% chloridu sodného, ​​maximální - mezi 0,34% a 0,32% chloridu sodného.

U hereditární mikrosférocytózy (Minkowski-Shoffarova choroba), autoimunitní hemolytická anémie, je pozorováno snížení osmotické rezistence červených krvinek. Ke zvýšené osmotické rezistenci červených krvinek dochází u hereditární hemolytické anémie spojené s nedostatkem glukóza-6-fosfát dehydrogenázy, u některých hemoglobinopatií (thalassémie)..

Měření průměru červených krvinek a grafická registrace distribuce červených krvinek v rozsahu (erytrocytometrická Price-Jonesova křivka) se provádí pomocí přímých mikroskopických a elektronicko-automatických metod.

Přímou mikroskopickou metodou je měření průměru červených krvinek ve fixovaném a obarveném krevním nátěru za použití okulárového mikrometru a mikrometrické čočky. Měří se průměr 200 až 500 různých červených krvinek, výsledky se dělí do skupin v závislosti na průměru a procento každé skupiny se stanoví v procentech (%).

Normy: obsah normocytů (průměr 6,9 až 8,0 mikronů) je přibližně 68%, mikrocytů (průměr méně než 6,9 mikronů) - 15%, makrocytů (průměr více než 8,0 mikronů) - 17%.

Přímá mikroskopická metoda je extrémně časově náročná, časově náročná, a proto nižší než elektronicko-automatická metoda.

Elektronicko-automatická metoda je výpočet červených krvinek různých průměrů pomocí čítačů „Culter“ a „Celloscope“.

Erythrocytometrická křivka Price-Jones má obvykle pravidelný tvar s vrcholem 7,2 mikronů a poměrně úzkou základnou v rozmezí 6 až 9 mikronů.

Při megalocytové anémii (vitamín B) je pozorován nárůst průměru červených krvinek (makrocytóza) s posunem křivky Price - Jones doprava.12-nedostatek kyseliny listové), s onemocněním jater, s alkoholismem.

S dědičnou mikrosférocytózou, anémií s nedostatkem železa, intoxikací olovem dochází ke snížení průměru červených krvinek (mikrocytóza) posunem křivky červených krvinek doleva..

Normální červené krvinky jsou ve tvaru disku s prohloubením uprostřed. V patologických případech se mohou objevit červené krvinky se změněnou formou. Změna tvaru červených krvinek se nazývá poikilocytóza. Byly nalezeny následující formy červených krvinek..

Sferocyty - erytrocyty, které mají kulatý nebo sférický vzhled, ztratily svůj bikonkávní tvar. Mikrosférocyty mají někdy normální velikost. Sferocytóza je dědičná a získaná. Pozoruje se u hereditární mikrosférocytózy (Minkowski-Shoffarova choroba), hemolytické anémie, sepse, umělých srdečních chlopní.

Ovalocyty (eliptocyty) jsou oválné červené krvinky. Nalezeno v thalassemii, dědičné ovalcytóze, těžké anémii s nedostatkem železa, anémii v leukémii.

Cílové červené krvinky (cílové buňky, leptocyty) jsou ploché, bledé, s centrální akumulací hemoglobinu ve formě cílů. K dispozici je thalassemia, těžká anémie z nedostatku železa, po splenektomii, s různými typy žloutenky, alkoholismus. Stomatocyty - centrální osvícení takových červených krvinek je zakřivené, připomíná tvar úst. Vyskytují se u dědičných stomatocytóz (viz hemolytická anémie), po krevní transfuzi, s nádory a cirhózou jater, akutní otravou alkoholem.

Acanthocyty jsou zoubkované červené krvinky s výčnělky různých velikostí. Nalezený v dědičných akantofocytech, těžkých jaterních onemocněních (toxická hepatitida, cirhóza), hypotyreóza, heparinová terapie, chronický alkoholismus, po splenektomii.

Echinocyty - červené krvinky s několika výrůstky, jako by byly pokryty hroty, ostny. Takové formy jsou pozorovány u trombocytopenické purpury, rakoviny žaludku, urémie. Pokud všechny červené krvinky mají takový tvar v nátěru, znamená to nesprávnou fixaci nátěru.

Červené krvinky ve tvaru slzy jsou ve formě kapek. Nachází se v myelofibróze a toxické hepatitidě.

Anulocyty jsou červené krvinky ve formě prázdných prstenců. Pozorováno v periferní krvi u těžkých forem anémie z nedostatku železa.

Kosáčovité erytrocyty (drepanocyty) jsou ve tvaru srpů, půlměsíce, ovesných zrn. Tvoří se srpkovitá anémie.

Na rozdíl od anizocytózy je poikilocytóza novějším znakem anémie a vyskytuje se ve závažnějších případech..

Zralé červené krvinky periferní krve obvykle neobsahují žádné inkluze. A pouze u retikulocytů se supravitálním zbarvením barvivem brilantní-cresil-blau je detekována zrnitá síťovina.

V různých patologických stavech se v periferní krvi nacházejí erytrocyty s různými inkluzemi: basofilická punkce - malá, modrá, granularita rovnoměrně umístěná v cytoplazmě, vyskytuje se v případech otravy olovem, rtuti a často s nějakou anémií (megaloblastická, talasemie atd.); Schuffnerovo mottání - jemná červená zrnitost, pozorovaná u třídenní malárie; špinění Maurera - malé šeříky nebo červené skvrny, nalezené v tropické malárii; Heintz-Erlichova těla - kulaté ostře definované inkluze na periferii erytrocytů, objevují se při otravě hemolytickými jedy, jako je nitrobenzen, anilin, fenylhydrazin a radiační nemoc Jollyho malá těla - kulatá, modrofialová barva formace; Kebotovy prsteny - jemné červené smyčky. Vypadají jako prsten, postava osm nebo houslový klíč. Jollyho těla jsou pozůstatky jaderné látky normoblastů a Kebotovy kruhy jsou pozůstatky jaderné membrány a nacházejí se hlavně v vitaminu B12- anémie s nedostatkem kyseliny listové, těžké otravy hemolytickými jedy.

Kromě Jollyho těl a Kebotových prstenů s vitamínem B12- a anémii s nedostatkem kyseliny listové v periferní krvi, můžete vidět buněčné prvky megaloblastického typu hematopoézy, která se obvykle pozoruje pouze v embryonálním období.

S megaloblastickou hematopoézou se místo erytroblastů vytvářejí megaloblasty v hematopoetické tkáni, které jsou schopné včasné hemoglobinizace, přičemž základní struktura zůstává zachována. Podle jejich afinity k alkalickým nebo kyselým barvivům se dělí na bazofilní, hydroxyfilní a polychromatofilní. Většina z nich se rozkládá v kostní dřeni, zatímco menší část dozrává na megalocyty, které vstupují do periferní krve. Při prudkém zhoršení nemoci vstupují do periferní krve nejen megalocyty, ale i megaloblasty. Megaloblast je velká buňka (s průměrem více než 15 mikronů) s excentricky uspořádaným kulatým nebo oválným jádrem. Megalocyty jsou nejaderné buňky o velikosti od 12 do 15 mikronů, výrazně nasycené hemoglobinem. Barevný indikátor je proto zpravidla na12- a chudokrevnost nedostatku listů je větší než 1,0 (tento druh anémie se označuje jako hyperchromic).

Sedimentace erytrocytů je schopnost krevních buněk vysrážet se (sedimentovat) mimo krevní oběh (na dně cévy při udržování krve v ne-sráživém stavu), přičemž na povrchu zůstává vrstva plazmy. Tento jev je základem stanovení rychlosti sedimentace erytrocytů (ESR), která je vyjádřena v milimetrech plazmy, která se usazuje po dobu jedné hodiny..

Nejběžnější mikrometoda pro stanovení ESR v Panchenkovově modifikaci.

Princip metody: Když je krev stabilizována citrátem sodným, červené krvinky se usazují různými rychlostmi v závislosti na fyzikálně-chemických vlastnostech krve. Rychlost sedimentace erytrocytů (ESR) je vyjádřena v mm / h.

Zařízení a činidla:

Panchenkovův aparát sestávající ze stativu s kapilárami širokými 1 mm, na jehož stěně jsou divize od 0 (výše) do 100 (dole). Na úrovni 0 mm je písmeno K (krev) a ve středu kapiláry poblíž značky 50 mm je písmeno P (činidlo);

aglutinace (Vidalevovy zkumavky);

5% čerstvě připraveného roztoku citranu sodného;

Průběh studia. Do Panchenkovovy kapiláry se odebere 5% roztok citranu sodného po značku „P“ - 50 mm a vhání se do Videlevovy zkumavky. Poté se za použití stejné kapiláry, která ji drží vodorovně, odebere krev dvakrát z píchnutého prstu ke značce „K“ - 0 mm a uvolní se do zkumavky s citranem sodným. Dobře promíchejte. Stejná kapilára sbírá citrátovanou krev ke značce „K“ a striktně svisle umístí do stativu. Výsledný poměr objemu krve a citranu sodného je 1: 4. Po 1 h je počet milimetrů plazmové kolony uvolněné z červených krvinek zaznamenán dělením na kapiláře.

Interpretace přijatých dat. Normální indikátory ESR:

u mužů - ESR 1-10 mm / h;

u žen - ESR 2-15 mm / h

Děti mají nižší ESR (1-8 mm / h) než dospělí a lidé středního věku jsou méně než staří lidé.

Změna v ESR s patologií.

Výrazné zvýšení - nádorová onemocnění, difúzní onemocnění pojivové tkáně, těžké infekce, onemocnění ledvin s nefrotickým syndromem, exprimovaný vitamin B12-anémie s nedostatkem kyseliny listové.

Mírný nárůst - akutní a chronická infekční onemocnění, lokalizované hnisavé procesy, infarkt myokardu, hypertyreóza, těžký diabetes mellitus, vnitřní krvácení, intoxikace rtutí a arsenu.

Snížení - erytémie, sekundární symptomatická erytrocytóza, acidóza, těžké srdeční selhání.

Stanovení osmotické rezistence červených krvinek

Stanovení sedimentační rychlosti erytrocytů (ESR)

Pokud je krev chráněna před koagulací (hemokoagulace) a ponechána nějakou dobu v cévě, pak se v průběhu času kvůli závažnosti červené krvinky usadí.

ESR je charakteristický pro každý druh, pohlaví a věk zvířat (ESR je u skotu, ovcí a koz velmi pomalý, u prasat středně rychlý, u koní velmi rychlý) a závisí na stavu těla. V některých fyziologických stavech (například těhotenství), alergiích as řadou chorob (tuberkulóza, anémie, hnisavý zánět atd.) Je ESR akcelerována. Proto je stanovení ESR důležitou diagnostickou hodnotou.

ESR závisí na rychlosti lepení (aglutinace) červených krvinek. V tomto případě se vytvoří tzv. „Sloupce mincí“. Aglutinace červených krvinek závisí na změně záporného náboje (v důsledku kterého se odpuzují) na pozitivní. Elektropozitivní náboj je udělován červeným krvinkám v důsledku adsorpce (absorpce) hrubě dispergovaných globulinových proteinů na jejich povrchu.

Pokrok K určení použité ESR Panchenkov zařízení. Přístroj je stativ, ve kterém jsou speciální kapiláry umístěny ve svislé poloze a kapiláry jsou odstupňovány v milimetrech. Značka 0 je 100 mm od konce. Na kapiláře jsou další dvě značky: K (krev) - ve výšce chladiče a značka P (reagent) - na úrovni 50 mm.

Kapilára se promyje 5% roztokem citrátu (citrát sodný). Poté se citrát shromažďuje ke značce P a vhání se do Petriho misky. Poté, ve stejné kapiláře, je krev zvířete dvakrát odebrána ke značce K. Obě části krve jsou smíchány s citrátem v Petriho misce. Výsledná směs krve s citrátem (v poměru 4: 1) se natáhne do kapiláry ke značce O a kapilára se umístí do stativu. Po hodině se podívají na výšku v milimetrech vytvořeného horního sloupce plazmy v kapiláře. Jeho hodnota je měřítkem ESR.

Rychlost sedimentace erytrocytů (ESR)

Skot - 0,5 - 1,5; ovce, kozy - 0,5-1; králíci - 1-2; kuřata - 2-3; psi - 2-6; prasata - 2-9; koně - 40-70 mm / h. Muž: muži - 3-9 let, ženy 7-12, novorozenci - 0,5, těhotná - 45 mm / h.

Reprodukce hemolýzy

Hemolýza - výstup hemoglobinu z červených krvinek skrze změněnou membránu do plazmy. Hemolýza může nastat jak ve vaskulárním loži, tak mimo tělo..

1. Mimo tělo může být hemolýza způsobena hypotonickými roztoky - osmotická hemolýza.

Izotonický (fyziologický) roztok - roztok chloridu sodného (0,85-0,9% roztok NaCl) mající osmotický tlak rovnající se osmotickému krevnímu tlaku.

Erytrocyt + fyziologický roztok → erytrocyt

Hypertonické řešení - roztok s vyšším osmotickým tlakem než krevní tlak.

Červené krvinky + hypertonický roztok → vrásky

Hypotonické řešení - roztok s nižším osmotickým tlakem než krevní tlak.

Červené krvinky + hypotonický roztok → červené krvinky bobtná, membrána je zničena, hemoglobin přechází do roztoku

2. Mechanická hemolýza. Je pozorováno při prudkém třepání a míchání krve.

3. Chemická hemolýza. Vyskytuje se působením kyselin, zásad, etheru, chloroformu. alkohol, hemolysiny, které způsobují denaturaci proteinů (koagulaci), narušení lipidů a narušení celého čísla červených krvinek.

4. Fyzikální hemolýza. Nízká teplota způsobuje destrukci červených krvinek. Denaturace membránových proteinů s vysokým obsahem erytrocytů.

5. Biologická hemolýza. Vyskytuje se u kousnutí jedovatých hadů, štírů, více bodnutí včel, malárie, transfúze nekompatibilní krve. U zdravého těla dochází k cévní hemolýze pouze v játrech, slezině a červené kostní dřeni. Taková hemolýza není doprovázena výskytem hemoglobinu v krevní plazmě, Biologická hemolýza způsobuje výskyt hemoglobinu v krevní plazmě (hemoglobinémie) a jeho vylučování močí (hemoglobinurie).

Tři zkumavky se umístí do stativu: 2 ml fyziologického roztoku se nalije do 1., 2 ml fyziologického roztoku a 2 kapky amoniaku do 2. a 2 ml destilované vody do 3.. Poté se do každé zkumavky přidají 2 kapky krve a zkumavky se mírně protřepají a promíchají se jejich obsah. V případě hemolýzy se roztok ve zkumavce stane transparentním „lakovaným“ odstínem.

Stanovení osmotické rezistence červených krvinek

Osmotická rezistence červených krvinek - jejich schopnost odolávat škodlivým účinkům nepříznivých faktorů (fyzických, chemických, mechanických atd.).

Podstatou metody pro stanovení osmotické odolnosti červených krvinek je stanovení jejich odolnosti vůči působení hypotonických roztoků chloridu sodného. Osmotická rezistence červených krvinek je určena koncentrací roztoku, při které hemolýza dosud nedochází..

123451% roztok NaCl, ml13579Destilovaná voda, ml97531Celkový ml1010101010Koncentrace NaCl,%0,10,30,50,70,9

Do každé z 5 zkumavek s různou koncentrací roztoků přidejte 2 kapky krve, vložte do stativu na 10-15 minut.

Ve zkumavkách č. 1 a č. 2 dojde k úplné hemolýze, ve zkumavce č. 3 dojde k částečné hemolýze (roztok změní slabou růžovou barvu, neporušené červené krvinky se usadí na dně). Ve zkumavkách č. 4 a č. 5 nedochází k hemolýze. Po 60–90 minutách se červené krvinky usadí na dně, roztok zabarví. Z toho vyplývá, že hranice rezistence červených krvinek leží mezi 0,5 - 0,7% roztokem chloridu sodného.

1. Jaký je mechanismus vlivu různých faktorů na ESR?

2. Jak to ovlivňuje rychlost sedimentace erytrocytů: zvýšení počtu červených krvinek v kolonách mincí a zvýšení obsahu globulinů v krevní plazmě?

3. Co je to hemolýza? Jaké typy hemolýzy existují?

4. Jaký je mechanismus hemolýzy v každém z pozorovaných případů??

5. Co je osmotická rezistence červených krvinek?

6. Jak zjistit osmotickou odolnost červených krvinek?

1. G.I. Azimov, D.Ya. Krinitsin; N.F. Popov Physiology, Agricultural zvířata. - M. - 1958.

2. Velká dílna o fyziologii lidí a zvířat. / Ed. L.L. Vasiliev, I.A. Vetyukova. - M. - 1954.

3. S.I. Halperin, fyziologie lidí a zvířat. Učebnice pro studenty vysokých škol a fakult. - M. - 1970.

4. Fyziologie člověka / S.A. Georgiev, N.V. Belinina, L.I. Prokofiev, G.V. Korshunov, E.F. Kirichuk, V.M. Golovchenko, L.K. Tokaev. - M.: Medicína. - 1981.

5 Human Physiology / Ed. G.I. Kositsky, 3. vydání, Revidováno. a přidat. - M.: Medicine, 1985.-- 544 s..

6. Průvodce praktickými cvičeními z fyziologie / Ed. G.I. Kositsky, V.A. Polyantseva. - M.: Medicine, 1988.

7. Korobkov A.V., Chesnokova S.A. Atlas normální fyziologie: Příručka pro stud. Miláček. a biol. University / Ed. NA. Aghajanyan. - M.: Vyšší škola, 1986. - 351 s.

8. Georgievsky V.I. Praktický průvodce fyziologií zemědělství zvířata. Učebnice příspěvek na zemědělství vysoké školy. M.: Vyšší škola - 1976. - 352 s,

RUSKÁ UNIVERZITA LIDSKÉHO PŘÁTELSTVÍ

ODDĚLENÍ ANATOMIE, FYZIOLOGIE

A ZVÍŘATA

o fyziologii a etologii zvířat:

Datum přidání: 2018-02-28; viděno: 482; OBJEDNÁVKA PRÁCE

Příznaky osmotické rezistence červených krvinek a metoda pro stanovení indikátorů

Červené krvinky (jiné jméno jsou červené krvinky) jsou krvinky, jejichž hlavní funkcí je transport kyslíku s krví z plic do všech orgánů a tkání a pohyb oxidu uhličitého v opačném směru. Jakékoli narušení normálního fungování těla může vést ke změně složení krve a následně k negativnímu účinku na tyto buňky.

Termín „odpor“ (z latinské rezistence - rezistence, rezistence) znamená rezistenci na jakýkoli faktor. Tento článek pojednává o osmotické rezistenci červených krvinek..

Osmotický tlak (z řeckého osmos - tlak, tlak) nastává v důsledku pronikání semipermeabilní membránou vody z roztoku s nižší koncentrací do roztoku s vyšší koncentrací k dosažení rovnováhy.

Osmotická rezistence červených krvinek

Pokud jde o červené krvinky, uvažuje se systém „krevní plazma - membrána - cytoplazma (vnitřní obsah buňky)“. Ale v lidském těle je membrána každé buňky selektivně propustná, to znamená, že koncentrace většiny látek v cytoplazmě buňky a jejího prostředí jsou různé.

Schopnost červených krvinek inhibovat osmotický tlak se nazývá osmotická rezistence..

Metoda indikátoru

V laboratoři je studium osmotické rezistence červených krvinek prováděno ředěním krve v roztokech chloridu sodného (NaCl) různých koncentrací. Ve srovnání s obsahem sodných a chlorových iontů v cytoplazmě erytrocytů se roztoky rozlišují:

  • Izotonický. Koncentrace soli je přibližně 0,9% - to je její norma v krvi. V tom nedochází ke změnám v krevních buňkách. Jeho jiné jméno je všeobecně známé - slaný roztok (slaný).
  • Hypotonický. Koncentrace iontů v nich je v důsledku osmotického tlaku nižší, voda vstupuje do červených krvinek a nabobtnávají hemolýzu (destrukci).
  • Hypertonický. Obsah solí v nich je větší - buňky uvolňují vodu a smršťují se.

Metodika hodnocení osmotické rezistence červených krvinek je následující:

  • hypotonické roztoky (protože v nich je pozorována hemolýza) chloridu sodného v různých koncentracích (obvykle v rozmezí 0,22 až 0,7%) se nalijí do zkumavek;
  • přidat 0,02 ml krve odebrané z prstu nebo ze žíly (odtud budou výsledky „čistší“);
  • výsledné roztoky se udržují na expozici asi hodinu (pro vliv osmotického tlaku na červené krvinky);
  • po odstředění obsahu zkumavky.

Stupeň hemolýzy je určen odstínem (úplná hemolýza je jasně červený roztok, jeho začátek je roztok s narůžovělým nádechem), pro získání přesnějších ukazatelů je použit fotokolorimetr - přístroj pro optické měření koncentrace látky.

V laboratorní diagnostice se pro stanovení osmotické rezistence červených krvinek používají následující indikátory:

  • Maximální odpor. Rovná se koncentraci roztoku NaCl, při které dojde k úplné hemolýze do tří hodin. Norma pro dospělého je od 0,32 do 0,34%; norma pro kojence je 0,24-0,32%, pro předškolní věk je 0,26–0,36%.
  • Minimální odpor. Rovná se koncentraci stejného roztoku, při níž se nestabilní buňky podrobí hemolýze během tří hodin (barva roztoku se ukáže být mírně růžová). Norma pro dospělého je 0,46 až 0,48%; norma pro kojence je 0,46–0,50%, předškolní věk je 0,46–0,48%.

Obecně je u lidí v pokročilém věku osmotická rezistence červených krvinek nižší; u dětí je vyšší, ale jeho rozsah je širší.

Důvody pro změnu ukazatelů

Ke zvýšení osmotické rezistence (maximální rezistence menší než 0,32%) dochází při následujících patologiích:

  1. Masivní ztráta krve (více než 5% objemu krve), protože se počet mladých červených krvinek zvyšuje jako kompenzační mechanismus v krvi, ale v podmínkách nedostatku zdrojů. Výsledkem je vytvoření velkého počtu buněk s nedostatečně silnými membránami..
  2. Ateroskleróza: deriváty cholesterolu se mohou ukládat na membránu erytrocytů, což vede ke změně jeho vlastností.
  3. Obstrukční žloutenka, její příčiny: zablokování žlučovodu v důsledku tvorby žlučových kamenů, onemocnění žlučníku a některých onemocnění jater.
  4. Dědičná anémie spojená se změnou struktury hemoglobinu (hemoglobinopatie): thalassémie, srpkovitá anémie.
  5. Dědičná onemocnění, jejichž výsledkem je struktura membrány erytrocytů (membránová patologie).
  6. Stav po odstranění sleziny.
  7. Pravá polycytémie - nadměrný nárůst počtu krvinek v důsledku nádoru v krevotvorných orgánech.
  8. Gastrointestinální rakovina.

Snížení osmotického odporu (minimum se zvýší nad 0,48%) může být spojeno s:

  1. Otrava olovem a jeho deriváty.
  2. Hemolytická anémie, při které dochází k masivní hemolýze červených krvinek. Důvody jsou různé: autoimunita, dědičná onemocnění, hemolytická žloutenka novorozenců a další.
  3. Mírný pokles je možný v důsledku tuberkulózy, srdečního selhání, leukémie (rakovina krve), cirhózy.

Příznaky patologické rezistence červených krvinek a metody boje

Normálně je jedním ze známek „starých“ červených krvinek (čas strávený v krevní plazmě: 100–120 dnů) nízká osmotická rezistence. Dalším je tvar buňky: zralé červené krvinky jsou bikonkávní, mladé buňky jsou mírně ploché a ty, které ukončují buněčný cyklus, jsou sférické. Imunitní buňky tyto buňky rozpoznávají a ničí ve slezině.

Patologická osmotická rezistence červených krvinek může vést k nekontrolované hemolýze přímo v krevním řečišti, což vede k následujícím příznakům:

  • bledost sliznic, někdy - kůže;
  • rychlá únava;
  • ztráta chuti k jídlu;
  • ztráta váhy;
  • stálé zvyšování teploty;
  • ospalost.

Vzhledem k nízké specifičnosti příznaků je tato patologie častěji detekována až po laboratorních testech. Nejúčinnějším způsobem léčby je odstranění příčiny, tj. Základního onemocnění (pokud je to dědičné, provádí se symptomatická terapie). Preventivní opatření jsou všeobecná: zdravý životní styl, správná výživa, včasný přístup k odborníkům.

Osmotická rezistence červených krvinek - koncept, metoda pro stanovení indikátorů

Pro posouzení fyzikálně-chemických vlastností červených krvinek se zkoumá jejich odolnost vůči různým vlivům. V praxi se nejčastěji určuje osmotická rezistence červených krvinek. Rozlišujte mezi minimálním a maximálním odporem. Minimální rezistence červených krvinek je určena maximální koncentrací hypotonického (méně než 0,85%) roztoku chloridu sodného (v sérii postupně klesajících koncentrací), při které začíná hemolýza nejméně stabilních červených krvinek v roztoku po dobu 3 hodin. Maximální rezistence červených krvinek je stanovena maximální koncentrací hypotonického roztoku chloridu sodného, způsobující hemolýzu všech červených krvinek během 3 hodin.

Sjednocená metoda pro stanovení osmotické rezistence červených krvinek při modifikaci L. I. Idelson

Zásada. Kvantitativní stanovení stupně hemolýzy červených krvinek v pufrovaných hypotonických roztocích chloridu sodného.

Činidla: zásobní roztok (osmotická koncentrace odpovídá 10% roztoku chloridu sodného), pH 7,4: bezvodý hydrogenfosforečnan sodný (Na2HPO4) - 27,31 g nebo krystalický hydrát (Na2HPO4 × 2H20) - 34,23 g; krystalický hydrát dihydrogenfosforečnanu sodného (NaH2PO4 × 2H2O) - 4,86 ​​g: chlorid sodný - 180 g; destilovaná voda - do 2 litrů. Roztok může být skladován v uzavřené nádobě v lednici několik měsíců.

Bázický roztok se zředí 10krát destilovanou vodou, čímž se získá roztok odpovídající 1% roztoku chloridu sodného osmotickou koncentrací. Z tohoto roztoku se připraví pracovní roztoky odpovídající roztokům chloridu sodného následujících koncentrací: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10 %%. Doporučuje se připravit 100 ml těchto pracovních roztoků. Skladujte v chladničce, jsou vhodné po dobu 2 týdnů.

Speciální vybavení: 1) fotoelektrokolorimetr; 2) termostat při 37 ° C.

Průběh odhodlání. 1,5 ml krve se přidá do dvou sterilních zkumavek se 2 kapkami heparinu (500 PIECES), smíchá se a jedna se použije pro výzkum a druhá se ponechá v termostatu na jeden den. 5 ml každého z pracovních roztoků s koncentrací chloridu sodného od 1 do 0,10% se nalije do řady centrifugačních zkumavek (14 ks). Do každé zkumavky se přidá 0,02 ml heparinizované krve a nechá se 30 minut při teplotě místnosti. Směs se odstřeďuje při 2000 ot / min po dobu 5 minut. Supernatant se vypustí z každé zkumavky a fotometricky při vlnové délce 500–560 nm (zelený filtr) v kyvetě s délkou optické dráhy 1 cm proti kontrolnímu vzorku..

Kontrolní vzorek - supernatant ve zkumavce obsahující pracovní roztok s koncentrací chloridu sodného 1%.

Způsob platby. Pro úplnou (100%) hemolýzu se hemolýza provádí in vitro s 0,1% roztokem chloridu sodného. Procento hemolýzy v každé zkumavce se vypočte porovnáním extinkční hodnoty supernatantu s extinkcí, považované za 100%, podle vzorce:

kde e1 - extinkce supernatantu ve zkumavce 0,1% roztokem chloridu sodného; EX - zánik zkušebního vzorku; 100 - úplná hemolýza in vitro 0,1% roztokem chloridu sodného.

Následující den zopakujte studii s krví inkubovanou po dobu 24 hodin při 37 ° C..

Normální hodnoty. U zdravých lidí začíná u čerstvé krve hemolýza (minimální rezistence vůči erytrocytům) při koncentraci chloridu sodného 0,50-0,45% a úplná hemolýza (maximální rezistence k erytrocytům) je pozorována v 0,40 až 0,35% roztoku chloridu sodného.

Klinický význam. Tato studie se provádí pro podezření na hemolytickou anémii. Sferocyty jsou nejméně rezistentní na hypotonické roztoky (výskyt hemolýzy erytrocytů byl zaznamenán při vyšších koncentracích chloridu sodného 0,75–0,70%). Snížení osmotické rezistence je pozorováno nejen u dědičné mikrosférocytózy, ale také u některé dědičné nesferérické hemolytické anémie s autoimunitní hemolytickou anémií. Zvýšení osmotické rezistence červených krvinek je charakteristické pro thalassemii, hemoglobinopatii, pravděpodobně s obstrukční žloutenkou.

Osmotická rezistence červených krvinek

K provedení těchto studií je nutné následující vybavení pracoviště:

  1. Stativ.
  2. Chemické nebo sérologické zkumavky.
  3. Odměrné pipety.
  4. Kapilární na Saliho hemometr.
  5. Finger Kit.
  6. 1% roztok chloridu sodného.
  7. Destilovaná voda.

Stanovení osmotického odporu podle Limbeka a Ribiera

Definice je založena na různé rezistenci červených krvinek k hypotonickému roztoku NaCl. Při určování osmotické rezistence červených krvinek jsou dodržována následující pravidla:

  1. Připraví se přesný 1% roztok chloridu sodného a z něj se opatrně připraví hypotonické roztoky NaCl.
  2. Hypotonické roztoky chloridu sodného se vylévají počínaje největším ředěním.
  3. Odebraná krev se nalije do zkumavek počínaje minimálním zředěním stolní soli.

Pro studii jsou požadována následující činidla:

  1. 1% roztok chloridu sodného: 10 g chemicky čistého NaCl se umístí do 1 L odměrné baňky a přidá se destilovaná voda ke značce.
  2. Roztoky chloridu sodného různých koncentrací se připravují z 1% roztoku NaCl podle schématu znázorněného na následujícím obrázku.

Technika definice. 26 zkumavek se instaluje do stojanu označeného odpovídající koncentrací hypotonických roztoků NaCl.

Za použití odměrné pipety se odebere 1 kal z každého roztoku a nalije se do vhodné zkumavky (roztoky se nalijí od koncentrace 0,2% NaCl). Do každé zkumavky, počínaje 0,7% koncentrací NaCl, se přidá 0,02 ml krve odebrané kapilárou z hemimetru. Obsah zkumavek je smíchán a ponechán při pokojové teplotě; výsledky se berou v úvahu po 6 hodinách (nejlépe za den). Minimální rezistence se bere v úvahu zředěním NaCl zkumavky, kde je kapalina pod sedimentem z červených krvinek slabě nažloutlá. Maximální odpor se bere v úvahu zředěním NaCl zkumavky, ve které jsou červené krvinky úplně hemolyzovány (krev v zkumavce je čirá a jasně červená)..

Normálně je minimální rezistence červených krvinek v rozmezí 0,5-0,46 a maximální - 0,32-0,3.

Top